环氧乙烷灭菌
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今天，我们接着写我们的环氧乙烷灭菌验证，第8节，我们谈过了验证的基础，也了解了灭菌的基础，也谈了环氧乙烷的一些特性，后续我们将需要将上述的三部分合并，今天，我们先合并其中的两项，即：环氧乙烷与灭菌的问题，包括环氧乙烷灭菌原理、环氧乙烷残留量、环氧乙烷灭菌周期、环氧乙烷灭菌后产品放行、环氧乙烷灭菌D值、环氧乙烷灭菌产品初始污染菌要求、环氧乙烷灭菌半周期法、以及环氧乙烷灭菌注意事项等等
环氧乙烷灭菌原理是通过其与蛋白质分子上的巯基（-SH）、氨基（-NH2）、羟基（-OH）和羧基（-COOH）以及核酸分子上的亚氨基（-NH-）发生烷基化反应，造成蛋白质失去反应基团，阻碍了蛋白质的正常生化反应和新陈代谢，导致微生物死亡，从而达到灭菌效果。
注：环氧乙烷气体灭菌时对湿度有要求。当相对湿度低于25%以下时，不可能达到灭菌，即使延长灭菌时间也无效。虽然环氧乙烷具有高效的消毒杀菌作用，但由于其有较宽的爆炸极限，对盛装容器的活性作用，以及它的刺激性和毒性，造成了苛刻的使用条件。为了在最大程度发挥环氧乙烷灭菌功效的同时保证其使用的安全性，目前比较流行的的是把环氧乙烷和惰性气体混合（氟利昂、二氧化碳和氮气），使环氧乙烷活性降低，改变爆炸极限，从而提高使用的安全度。由于2000年以后氟利昂因环保问题被淘汰，而二氧化碳的比重和分子量和环氧乙烷比较相近，因此常用70%的二氧化碳和30%的环氧乙烷的混合气体来进行灭菌。
环氧乙烷残留量是指经环氧乙烷处理后，残留、吸附在物品中环氧乙烷的量。不同的物品环氧乙烷残留量要求不同，目前对一次性医疗用品出厂时环氧乙烷残留量的要求为不大于10μg/g （GB15980-1995《一次性使用医疗用品卫生标准》）；
灭菌环境中环氧乙烷的浓度应低于2mg/m3 （GB11721-89《车间空气中环氧乙烷卫生标准》）。
影响环氧乙烷残留量的因素很多，主要与材料的组成、包装、灭菌时环氧乙烷浓度、作用时间及解析方法、季节等因素有关，有条件的厂家采用混合气灭菌及纸塑包装来降低环氧乙烷残留量（这一点可以在后续接着聊）。
环氧乙烷灭菌周期是指实施环氧乙烷灭菌的全过程。在一密闭的柜室内，包括进行去除空气、处理（若采用）、加入灭菌剂、EO作用、去除EO和换气（若采用）的一系列处理步骤。
环氧乙烷灭菌后产品放行是指根据灭菌过程物理参数和生物指示物培养结果来评价灭菌过程，决定产品是否放行。生物指示物总是应当与物理的和（或）化学的监测配合在一起使用，以证明灭菌工艺的功效。不管生物指示物获得的结果如何，若灭菌工艺的某物理/化学变量超了规定范围，灭菌周期均应视作未达到预期目标。产品放行中常用的生物学性能鉴定方法之一为半周期法。
环氧乙烷灭菌D值是指杀灭90%微生物个体所需的时间（min），这个与湿热灭菌的概念里是一致的。用环氧乙烷杀菌气体灭菌时，灭菌柜内的温度、湿度、灭菌气体浓度、灭菌时间都是影响灭菌效果的重要参数。环氧乙烷是一种烷化剂，穿透力强，能够使用各种包装材料并且可以在包装状态下灭菌，在常温下能杀灭各种微生物（包括细菌、芽孢、病毒、真菌孢子等），适用于不耐高温处理的生物医用高分子材料，比如天然橡胶、聚乙烯、聚丙烯及聚氯乙烯等。环氧乙烷灭菌器包括一个防泄漏、防爆炸的钢制腔室，首先通过加热（预处理）过程，调节腔内的物料温度和湿度，然后进一步抽真空，再通入经过预热的环氧乙烷气体。包装材料必须是对空气、蒸汽及环氧乙烷渗透性良好的，这样容易达到适宜的灭菌条件。
环氧乙烷灭菌半周期法是指除时间外所有其他过程参数不变情况下，确定无存活菌的EO最短作用时间。应再重复两次实验来证实该最短灭菌时间，两次重复试验均应无菌生长。规定的作用时间应至少为最短灭菌时间的2倍。半周期法的实际应用方法为：以初始灭菌工艺的灭菌时间为起点，以试验生物指示物无菌为标准，在保证其他灭菌工艺参数不变的情况下，逐次将灭菌时间减半，直至找出试验生物指示物无菌的EO最短作用时间（时间临界点）。如：初始灭菌时间为8hr，则第1次灭菌循环：灭菌时间8hr，如无菌；进行第2次灭菌循环：灭菌时间第一次的一半，即4hr，如无菌；则进行第3次灭菌循环：灭菌时间为第二次灭菌时间的一半，即2hr，如有菌，再进行第4次灭菌循环：第四次灭菌时间为第二次与第三次的中值，即3hr，如无菌，则3hr为时间临界点；如有菌，则确定4hr为时间临界点。
环氧乙烷灭菌产品初始污染菌要求：是指灭菌前，附着在包装材料和医疗用品上的全部活的微生物之和。灭菌产品管道类内腔≤10cfu/件次，外部≤100cfu/件次；非管道类≤100cfu/件次；敷料类≤100cfu/g；消毒产品≤1000cfu/件次或重量（g）。应当指出，初始污染菌是产品从原料、加工、外协件、组装、过程检验、车间与员工卫生状况、传递、包装等环节中被污染的，它提供微生物污染信息，了解微生物污染水平，有利于分析污染微生物分类，用以提高产品安全卫生水平。初始污染菌的检验是方法结果，没有一个方法能检出产品存活全部微生物。当然，其相应的GB15980-2009《一次性使用医疗用品卫生标准》中有关于灭菌产品初始污染菌的要求。目前该国标已经废止。企业可根据产品质量要求确定产品的初始污染菌和微粒污染的控制水平并形成文件。【针对这部分，有专门的讨论和扩展，有时间后续可以整理给大家】。
环氧乙烷灭菌注意事项方面，由于环氧乙烷具有潜在的致癌性、致突变性、急性毒性反应，为了工作人员的安全，应在灭菌过程中，严密监控大气浓度和腔室的温湿度、压力、环氧乙烷气体浓度及灭菌时间。灭菌效果通常使用生物指示剂来监控。灭菌器的控制具有一定难度，整个灭菌过程应在技术熟练人员的监督下进行。灭菌处理后，应通入过滤后的无菌空气，经历真空空气循环过程，使残留环氧乙烷安全去除。由于环氧乙烷的易爆特性，环氧乙烷灭菌装置应符合相应的标准，灭菌车间的管理应执行一次性使用无菌器械产品（注射输液器具）生产实施细则要求：
制定完善的经验证可行的灭菌工艺方案以及环氧乙烷存放、收发制度，专人持证上岗，严格按照操作规程运行
环氧乙烷储存应与灭菌生产隔离开来，应设有防爆墙，储存室阴凉、通风、防晒，有易燃、易爆、有毒标志，并配备消防器材。
灭菌车间周围30-50米内不得有明火作业、变电设备及其他可发生火花的设备或操作
灭菌过程中严禁穿有钉的鞋进入现场，严禁操作现场抽烟，以防引起爆炸事故
操作过程中，密切注意压力、温度变化，随时进行调整
灭菌过程结束打开灭菌器时，必须先打开门窗及通风设备，室内环氧乙烷气味很浓时，不得开启电灯照明及手电照明，防爆灯除外。
灭菌结束后排放的环氧乙烷残余气体应进行妥善处理并符合环保要求
篇幅问题，就写到这吧，下一稿，我们接着聊，如何进行环氧乙烷灭菌验证，敬请期待。
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